A cromatografia de afinidade representa hoje uma poderosa ferramenta para o reconhecimento de ligantes enzimáticos proporcionando o estabelecimento de métodos altamente seletivos, rápidos e eficazes para aplicação em matrizes de alta complexidade, como a matriz vegetal. Este projeto visa aplicar duas abordagens da biocromatografia visando a busca de potenciais inibidores da xantina oxidase (XO) provenientes de plantas medicinais com o estudo dos parâmetros cinéticos e de inibição: uma utilizando a cromatografia bidimensional com um reator enzimático capilar (ICER-XO) e outro com partículas magnéticas para a "pesca" de ligantes em extratos vegetais. A enzima XO foi selecionada para esse estudo por ser bem caracterizada como alvo no tratamento de diversos estados patológicos, envolvendo inflamação, aterosclerose, hipertensão, carcinogênese, entre outras, e também por haver necessidade urgente do desenvolvimento de inibidores mais efetivos e menos tóxicos que o alopurinol, principal opção terapêutica disponível. O grande potencial das plantas como novos agentes terapêuticos, a efetividade desses modelos de estudo de compostos sintéticos e o envolvimento do CPQBA no estudo de plantas medicinais motivaram esse projeto de pesquisa para a busca de inibidores da XO de origem natural. (AU)

A espécie Pfaffia paniculata Kuntze (Amaranthaceae) conhecida como ginseng brasileiro pela similaridade da morfologia de suas raízes com o ginseng asiático (Panax ginseng. - Araliaceae) é muito utilizada na medicina popular como tônico afrodisíaco e antidiabético. Dentre as várias atividades terapêuticas de suas raízes inclui-se a atividade analgésica, antiinflamatória e anti-tumoral. A atividade anti-tumoral, atribuída ao ácido pfáffico presente nas raízes de P. paniculata despertou grande interesse pela comercialização desta espécie. No Brasil, embora a espécie P. paniculata seja a mais empregada em preparações comerciais a espécie P. glomerata é normalmente utilizada como seu substituto principalmente na região sul do país ou em mistura (fraude), uma vez que a P. paniculata é de difícil cultivo. É importante salientar que as espécies de P. paniculata e P. glomerata possuem constituições químicas diferentes consequentemente, diferentes atividades farmacológicas, sendo necessário a utilização de um controle de qualidade adequado para a diferenciação das espécies. Uma vez que o ácido pfáffico encontra-se presente apenas na P. paniculata, a autenticidade desta espécie pode ser realizada através da quantificação deste composto na raíz, o que vem justificar a necessidade de um método analítico validado. Porém, o principal desafio no desenvolvimento deste método analítico é a indisponibilidade comercial do padrão analítico de ácido pfáffico, levando à necessidade de isolamento do mesmo, além da dificuldade química da molécula (ausência de cromóforos e alta polaridade). A importância terapêutica da P. paniculata, sobretudo como anti-tumoral, a disponibilidade de uma coleção de diferentes genótipos no Campo Experimental do CPQBA e a falta de um método analítico apurado para o controle de qualidade desta espécie brasileira motivaram a elaboração deste projeto, que visa validar um método cromatográfico para aplicação no controle de qualidade do ginseng brasileiro